Диагноз на такие аллергические реакции как астма, дерматит и полиноз, обычно ставится на основании анамнеза и клинических признаков. Измерение содержания общего иммуноглобулина Е имеет большое значение для подтверждения клинического диагноза. Высокие уровни иммуноглобулина Е могут указывать на IgE-опосредованную гиперчувствительность, которая может сопровождаться развитием различных аллергических реакций. Кроме того, некоторые паразитарные заболевания могут сопровождаться повышенным уровнем IgE. Калибраторы иммуноглобулина IgЕ, входящие в состав набора, откалиброваны по 2 Международному стандарту ВОЗ 75/502, единицы измерения концентраций - МЕ/мл.
Принцип метода
Тест фирмы HUMAN основан на прямом методе определения антигена ИФА. На лунках микропланшета адсорбированы моноклональные антитела к IgE человека. При первой инкубации в лунки микропланшета вносятся калибраторы, образцы сыворотки и ферментный конъюгат, содержащий антитела к IgE. В случае присутствия в образце сыворотки IgE антител, они связываются с антителами, иммобилизованными на поверхности лунок микропланшета и с антителами ферментного конъюгата, образуюя комплексы типа «сэндвич».
После инкубации несвязавшийся конъюгат и моноклональные антитела удаляются промывкой. Добавление в лунки субстрата приводит к образованию окрашенного продукта, который меняет цвет на желтый при добавлении стоп-реагента, вносимого для остановки реакции. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации общего IgE в пробе.
Оптическая плотность калибраторов и исследуемых образцов сыворотки измеряется фотометрически при помощи специальных микропланшетных фотометров (например, приборах линии HUMAREADER или ELISYS производства фирмы HUMAN). Численное значение концентрации определяется с помощью калибровочной кривой, построенной по калибраторам, входящим в состав набора.